导演:布莱恩·斯派克
主演:安宥真,李泳知,金美贤,李恩智
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SDS-PAGE凝胶电泳,即聚丙(🆎)烯酰胺凝胶电泳,是生物化学和(hé )分子(🦇)生物学实验中常用的蛋白质分离和鉴定技(jì )术,这项(xiàng )技术的基本原理是利用蛋(🙇)白质在电场中的迁(qiān )移率与(yǔ(🌼) )其分子量(🍑)成反比的(de )关系(xì ),通过添加阴离子(zǐ(🐴) )洗涤(dí(🔀) )剂SDS(十二烷基硫酸钠)使蛋白质带上负电荷,从而(ér )消除(⛪)了蛋白质原(🆑)有的电荷差异,使得(🕴)蛋白质的迁移仅受其(qí )大小的影响。
操作步骤方面,首先需(xū )要(yào )制备适当浓度和pH值的(de )聚丙烯酰胺(💤)凝胶,然后将含有SDS和还原剂的蛋白质(⛑)样(🕘)品加入凝胶(😯)孔(kǒng )中(🐏),通电后,蛋白质开始根据大小分离(🏹),小分子蛋白质移动得更(gèng )快,而大分子蛋白质则较慢,通过染色(sè )或西方印迹等方法可以检(jiǎn )测和(hé )分析蛋白质。
应用范围广泛,SDS-PAGE不仅用(yòng )于(🈸)蛋白质分子量的测(cè )定,还广泛应用(yòng )于蛋白(bái )质纯化程度的分(fèn )析(🧕)、蛋白(bái )质(zhì )变性和复(fù )性(➿)研究(📱)以及蛋白质-蛋白(bái )质(⚓)(zhì )相互作用的研究,它也是研究蛋白(bái )质翻译后修(xiū )饰的重(📓)要工具。
尽(jìn )管SDS-PAGE是一种强大(dà )的分析工(🍭)具,但它(tā )也(yě )有(yǒu )局(jú )限(🔌)性,对于(yú )极端大小的蛋白质,分辨率可能会(⏭)降低;某些蛋白质(😱)可能因为(🙈)结构的特殊(shū )性而在凝胶中(zhōng )的迁移不符合预(yù )期,在进行SDS-PAGE分(🔄)析时,通常需要结合其他生化(huà )和分子生物学技术以获得更准确的结果。
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